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近日，《自然·通讯》（Nature Communications）在线发表了上海海洋大学陈良标和胡鹏团队的一项成果。研究团队成功在活体鱼类胚胎中实现了单细胞新生RNA测序技术的系统优化和应用，首次实现了对“合子激活”阶段新转录基因的高灵敏度、高准确性检测。这项技术突破不仅打开了研究生命起源奥秘的新窗口，也为水产育种的基因精准设计提供了重要工具。
胡鹏教授曾在博士后期间参与开发了检测新合成RNA的前沿技术-单细胞新生RNA测序技术（scNT-seq）。此次研究中，团队围绕鱼类胚胎模型，开展了系统性优化。一方面实现系统评估标记方法。研究团队对10种主流RNA化学转化方法进行了系统筛选，并在超过5万个斑马鱼细胞中测试。最终发现，基于mCPBA/TFEA的“on-beads”转化方案，能实现超过8%的T-to-C替换率，表现远优于传统“体内标记”（in-situ labeling）方法ayx体育在线登录手机app下载，在信号强度和RNA质量上均表现卓越。另一方面，精准标记新合成RNA。团队在模式鱼类-斑马鱼受精卵的一细胞阶段显微注射4-硫尿苷（4sU），实现了对合子新转录RNA的高效标记，犹如在新产生的RNA上做下特殊标记ayx体育在线登录手机app下载，便于后续识别。
研究实现了诸多突破。首先，检测灵敏度大幅提升。优化后的方法能在海量母源RNA背景下清晰捕捉新合子RNA信号。其次，母源和合子RNA实现精准区分ayx体育在线登录手机app下载，通过计算新RNA占比，精确判定哪些基因是胚胎合子激活的。最后，发现更多关键基因。相较以往，本研究识别出更多此前未被报道的合子激活基因，并通过原位杂交实验验证其在整胚中的表达模式。
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